Image J 分析western-blot条带灰度值

ImageJ这套软件不但可以计算计算细胞数,也可以定量分析DNA电泳或是Western blot条带的灰度值。今天我们就学习一下如何分析western-blot的条带的灰度值。

western-blot条带灰度值分析

  • 01

    打开Image J软件,进入软件主页;

  • 02

    打开软件后,开启图档;

  • 03

    请先做校正,选择Analyze底下的Calibrate选项,再选择校正的模式,使用Uncalibrate OD,再按ok,按下ok之后会出现校正的图形;

  • 04

    在要分析的第一条(first lane)加上一个长型框(工具列第一个选项),再按下Analyze/Gels/select first Lane快速键(Ctr+1),此时框架中会出现一个号码1,之后可以移动框架到第二个lane再选择Analyze/Gels/select second Lane快速键(Ctr+2),当然可以一直加下去,最后按Analyze/Gels/plot Lanes快速键(Ctr +3)。

  • 05

    分析后会出现图型表示你刚选择的框内的影像强度,此时可以看到有几个比较高的区段,就是我们想定量的band,使用直线工具(工具列第五个选项)先将图形中高点为有band的区域和没有band的区域分开再,使用魔术棒工具(工具列第八个选项)点选要分析的区域。

  • 06

    当我们点选分析时,在result的对话视窗会出现分析的数据,依序点选就会出现每个band的值。

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